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最后更新: 2022-01-02 11:00
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产品详细说明

Sigma胎牛血清F2442

生物来源:bovine fetus

无菌性:sterile-filtered

产品线:FBS Classic

组成:

Bovine IgG, ≤1 mg/mL

Hemoglobin, ≤20 mg/dL

来源:USA origin

Sigma胎牛血清应用:

cell culture | hybridoma: suitable

cell culture | mammalian: suitable

杂质:≤10 EU/mL endotoxin

运输:dry ice

储存温度:?20°C


Sigma胎牛血清一般描述

胎牛血清(FBS)是一种由低、高分子量生物分子组成的复杂混合物,具有zui佳的生长促进和抑制功能。FBS中含有如生长因子、蛋白质、维生素、微量元素、激素等多种分子。这些分子对于细胞的生长和维持至关重要。它是细胞培养基中的一种常见补剂。FBS来自于小牛血。它不含有纤维蛋白和凝血因子。FBS的热灭活可阻断补体系统。来源于凝结血的FBS是真核细胞,尤其是哺乳动物细胞培养中zui广泛使用的未确定补充剂。它通常与在1950年代和1960年开发的经典培养基一起使用。这些包括多种常用培养基,如Minimum Essential培养基(MEM)、Dulbecco′s改良Eagles培养基(DME,DMEM)、Iscove′s改良Eagles培养基(IMDM)、M199以及Roswell Park Memorial Institute培养基RPMI-1640。

Sigma胎牛血清还可作为组分用于:

血管周围巨噬细胞样黑素细胞(PVM/M)生长培养基

合成输卵管液(SOF)

Eagle′s minimum essential培养基(EMEM)

neurobasal培养基

Hyclone McCoys 5 A培养基

Hanks培养基

Sigma胎牛血清生化/生理作用

Sigma胎牛血清仍然是一种常用的培养基补充剂,因为它在细胞培养中提供了广泛的功能。FBS提供营养、生长和附着因子,并通过难以在无血清培养基(SFM)系统中复制的机制保护细胞免受氧化损伤和细胞凋亡。

Sigma胎牛血清分析说明

内毒素和血红蛋白测试

检测了是否存在细菌、病毒和支原体

在无菌条件下用0.1微米膜过滤三次

Sigma胎牛血清其他说明

对是否存在细菌、病毒、支原体、内毒素以及血红蛋白进行了检测。在无菌条件下用0.1微米膜过滤三次。

八、牛血清污染噬菌体的问题。

1、问:有谁知道小牛血清制造过程中怎样能够避免噬菌体的污染,以及对已污染噬菌体的牛血清怎样能够除去噬菌体?

2、问:我也想知道,我用的血清中大部分都有噬菌体,它对细胞培养到底有什么影响?

暂无回答。

九、培养基血清浓度问题。

问:在1640里加血清时加多了,90ml里加了20ml血清,约为18%,以前都是加10ml的,查了网上多建议用 10%-15%,有关系吗?

答:我认为一般来说血清浓度的较大播动对细胞的状态影响较大,建议再加90ml1640调成10%。血清浓度大当然细胞状态感觉要好,但是高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果。10%的浓度培养鼻烟 癌细胞很好。

十、问:MTT加药的时候加不加血清?加药时要用无血清的培养基吗?

答:我的药就是用含血清的培养基稀释的,不含血清的培养基对细胞有毒性或抑制作用,无形中对细胞造了一个serum-free的模型,细胞在提内本来就是有血清供应,如果该药物都不能对抗,那该药物就没有什么临床价值了,这是我的理解。

十一、PC12细胞培养所用血清问题。

问:我正准备购买上海细胞所的未分化的PC12细胞,需要灭活的马血清,有一种Donor Equine serum是马血清吗?

答:Donor Equine serum可以用。另外:我买了以后灭活的。

十二、AB血清的制备问题。

问:本人想从人的外周血中分离AB血清的,用于B淋巴细胞的培养。谢谢大家给点建议。人的血,来之不易啊。

答:是AB血型人的血清吗?这种血清即没有抗A型抗原抗体,也没有抗B型抗原抗体。分离血清时将采集的血液注入试管中,待血液凝固后离心分离血清。可将采集的血液放在37℃水浴箱中促进血液凝固,减少凝固时间。离心可在2500~3000rpm,10min,足可以分离血清。分离后将血清吸出保存即可。分离血清的量可按采集血液的50%左右计算,因为红细胞占总血液的50%左右。当然整个过程要注意无菌操作。

十三、胎牛血清内是否含糖?

问:我想做糖诱导细胞凋亡的试验。细胞培养液里加入了20%的胎牛血清。因此胎牛血清里是否含有糖对我实验的培养液糖终浓度影响比较大。

答:应该是不含糖的。

十四、血清或培养基产生了颜色或沉淀的问题:

1、问:我用的是Bovogen牛血清,56 ℃ 30分钟灭活后出现了白色少量絮状沉淀,是不是污染?还能不能再用?

答:应该问题不大。你可以取少量血清放入培养皿中,37℃过夜培养看看就知道是否污染了。血清中沉淀物的出现有许多种原因,但zui普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成,而血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在 血渭解冻后,也会存在于血清中,亦是造成沉淀物的主要原因之一。但这些絮状沉淀物,并不影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g稍微离心,上清液即可接着加入培养基内一起过滤。

2、问:我用MTT法测细胞的增殖,用DMSO裂解细胞,发现把DMSO加入到孔中就会形成乳白色(用的含胎牛血清的1640培养基,由于没有离板子的离心机,所以没有去除培养基直接加的DMSO)。以前用含小牛血清的培养基没有 看到有这种情况。该怎么解决?

答:为什么要用离心机离心呢?难倒你养的是悬浮细胞吗?如果是贴壁细胞的话直接将MTT倒掉,再加DMSO 即可,我们就是这么做的,效果很好!并且测细胞的增殖的话如果不去掉MTT就加DMSO的话误差应该很大!有时不一定就是血清的原因,可能跟你的MTT放置的时间或以及其他成分有关!

3、问:(1)胎牛血清500ml,今天解冻后没有混匀直接分装,结果使得前面的几管是清亮的,后面就带有棕色的,不知有没有影响?估计有什么影响?前面的成分好还是棕色的成分好啊?

答:肯定有。zui好还是重新混合重新分装,我觉得有效成分会集中在棕颜色部分。

问:(2)为什么会出现棕色呢?

答:血清中的棕色多一些可能是因为红蛋白的含量高些的缘故吧。

问:(3)血清灭活之后可以存放吗?我的是前天灭活的,但是没有加到培养基里,而是放在冰箱里,那下次可以直接用吗?还是再次灭活啊?

答:当然可以,如果多的话,分装后zui好放在-20℃,下次用时再解冻,也不用再灭活。zui好用一管拿一管,少许血清可以放在4℃。分装时还要注意不要装得太满,以免溢出污染。

十五、污染和过滤的问题。

1、问:怀疑血清染菌,想用滤膜过滤一下,可否自己用0.22μm滤膜过滤?对血清性质有多大影响?有做过的么?

答:可以过滤的,血清当出厂时都是0.22μm或0.1μm过滤除菌。想证明有没有染菌不用过滤这么麻烦,只要放置于37℃过夜就可以了,如果有微生物污染会变浑浊的,如果还是澄清的就说明没有问题的。实验室中血清很难直接过滤,一般要加到培养基中再过滤。我们实验室制备培养基时,都使用滤膜过滤,一般而言如果制备1-2瓶培养基,一个滤膜及一支30ml注射器可以过滤50ml小牛血清。如果大量制备培养基也可以将血清加到培养基中,使用0.22微米的大滤膜一起过滤。

2、问:我怀疑我用的完全1640培养液被污染了,准备重新过滤消毒,过滤后是否需要补充胎牛血清?如需又如何补充?

答:完全1640培养液被污染了,如果是支原体的话,过滤没有作用,支原体可以通过滤膜。我们用1640液,都是配液后保留500ml,然后其他的分装100-200ml,现用现配因为血清比1640要贵,如果你想过滤的话,建议你加原比例血清,因为血清不会很容易通过滤膜。主要的还是找到可能污染的原因。

3、问:加好了血清双抗的培养基由于污染了再过滤后还能用吗?

答:建议不要用了。在加了双抗的情况下已经污染,那么细菌污染的可能性会较小了。一般的过滤除不能 去除病毒或者部分真菌的污染的。

4、问:我准备把使用的完全1640培养液重新过滤一遍,不知道培养液中的血清成分是否能通过滤膜,过滤后是否还需要补充胎牛血清?如需又如何补充?

答:可以透过,但是随着液体量的增多会很慢,如果不加压会比较麻烦,还有zui好用低蛋白吸附的,不然损失是比较大的。

 
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